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免疫细胞化学鉴定第三代细胞特异性

作者:毕业论文网时间:2022-05-26 22:23:50阅读:264来源:本站

2.1细胞形态学观察。经过两天的原始训练,可以在组织块周围看到丝绸。在第三天,可以看到一些细胞从组织块的边缘垂直游出(图1A),但并非所有的组织块都在周围。在第6天,明显的细胞生长光晕形成在种植块周围(图1B),细胞呈放射状排列,然后形成细胞簇;细胞形状多样,呈梭形、多角形、星形或不规则形状,有些发生细胞突出;细胞浆丰富,均匀透明;核卵圆处于中间,偶有2~3个核仁。VSMC相互融合。细胞密集,排列平行。当密度较低时,它们通常是网状的。当密度较高时,它们是漩涡或栅栏状的。在第二周,他们形成了典型的峰-谷生长的结构特征,没有铺路石排列的内皮细胞。可以看出,这种方法培养的VSMCs具有高纯度。此外,随着细胞数量的增加和细胞的增殖,细胞之间逐渐融合,整个瓶底在两周左右逐渐重叠,第一次传播。

2.2细胞鉴定。

2.2.1免疫细胞化学鉴定第三代细胞特异性α-SM-actin免疫细胞化学染色后,大量棕色纤维细丝与细胞长轴平行,即平滑肌α肌动蛋白丝,在高倍镜下可见细胞质。核卵圆中间呈浅蓝色,见图2A和2B。

2.2.2培养细胞免疫荧光染色超过95%α-SM-actin免疫荧光染色阳性,见图2C。

2.3台希望蓝色染色结果计数500个细胞,其中11个呈阳性,约98%的细胞染色呈阴性,表明培养后的细胞具有较高的成活率。

2.4VSMCs的生长曲线在半对数坐标纸上绘制VSMC的生长曲线(图3),以培养天数(日)为横轴,以细胞活力(OD570nm)为纵轴。如图所示,VSMCs在1×104cels/ml密度接种后的第二天出现对数生长期,在3~5天内出现平台期,在第6天出现下降期。


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